自动生物荧光成像系统原理与高通量应用​

　　自动生物荧光成像系统在传统落射荧光显微镜基础上集成电动物镜转盘、电动X-Y载物台、自动对焦及多孔板自动扫描功能，通过软件一站式完成大批量样品的自动采集、拼接与基础三维重构。
 

　　一、宽场荧光成像原理简述

　　ABM采用汞灯/金属卤素灯或LED宽带光源，经激发滤片立方体（EX/EM/BS组）激发样本荧光，由高灵敏CCD/sCMOS相机采集全视场荧光图像（宽场模式，非共聚焦）。系统通过电动Z轴做Z-stack采集后可做3D反卷积或最大强度投影，获得近似层析效果。自动对焦基于图像对比度算法或红外测距，保证多孔板长时间序列中不跑焦。

　　二、自动化功能特点

　　电动物镜转换与倍率记忆：鼠标一键切换物镜，软件自动记录放大倍率与像素尺寸。

　　AutoFocus：单点或多点聚焦评估，适合孔板不同孔液面微差异。

　　AutomaticWellPlateScanning：选择6/12/24/96/384孔板类型后软件生成坐标图，点击即移入对应孔并自动对焦拍照。

　　Z-STACK+3DDeconvolution：支持Top/Bottom、Center/Range、Upper/Lower三种Z范围设定，内置3D反卷积算法重构细胞核/细胞质的空间分布。

　　TileStitching：设定扫描区域自动拼合为大图，适合组织切片或划痕实验全景记录。

　　TimeLapse：按间隔采集序列，监测细胞迁移、分裂或转染效率变化。

　　SNAP（单点/多点）：单点快速抓图或多点定义区域依次采集，便于对照比较。

　　三、典型应用

　　细胞转染效率评估（GFP/RFP阳性率统计）

　　免疫荧光染色强度半定量（核/胞质ROI平均强度）

　　多孔板药物处理后人源/动物细胞形态与标记物变化

　　固定细胞/组织片大视场拼接存档

　　教学与常规科研中替代手动荧光镜检，提高重复性与数据规范性

　　自动生物荧光成像系统通过全电动控制与智能化软件将传统荧光显微镜升级为可高通量、可定量的成像工作站，适合需批量采集与初步定量的细胞生物学与药筛实验室使用。